Ujian serologi: jenis, penggunaan

diagnosis makmal hampir semua penyakit berjangkit adalah berdasarkan kepada pengesanan darah dalam antibodi pesakit, yang dihasilkan oleh antigen patogen, kaedah serologi. Mereka masuk ke dalam amalan perubatan di kesembilan belas lewat - awal abad kedua puluh.

Perkembangan ilmu pengetahuan telah membantu untuk menentukan struktur antigen mikrob dan formula kimia toksin mereka. Ia adalah mungkin untuk membuat serum bukan sahaja terapeutik tetapi juga diagnostik. Mereka diperolehi dengan mentadbir patogen dilemahkan haiwan makmal. Selepas beberapa hari merendam arnab darah atau tikus produk yang digunakan untuk mengenal pasti bakteria atau toksin mereka menggunakan ujian serologi disediakan.

Manifestasi luaran tindak balas ini bergantung kepada syarat-syarat rumusan dan keadaan antigen di dalam darah pesakit. Jika mikrob adalah zarah tidak larut, mereka menyelesaikan, lysed, bergerak atau terikat dalam serum. Jika antigen larut, ternyata fenomena peneutralan atau hujan.

agglutination (PA)

ujian agglutination serologi adalah sangat khusus. Ia adalah mudah untuk melaksanakan dan cukup jelas untuk cepat mengesan kehadiran antigen di dalam serum pesakit. Ia digunakan untuk menetapkan reaksi Vidal (diagnosis demam kepialu dan paratifoid) dan Weigl (tifus).

Ia adalah berdasarkan kepada interaksi tertentu antara antibodi manusia (atau agglutinins) dan sel-sel mikrob (agglyutenogenami). Berikut interaksi mereka terbentuk zarah yang mendakan. Ini adalah tanda positif. Untuk menetapkan tindak balas boleh digunakan ejen hidup atau mati mikrob, kulat, protozoa, sel-sel darah dan sel-sel somatik.

tindak balas kimia dibahagikan kepada dua peringkat:

1. antibodi tertentu kompaun (AT) dengan antigen (Ag).
2. Tidak spesifik - pemendapan konglomerat AG-AT, iaitu kejadian agglutinate itu.

Reaksi agglutination tidak langsung (TPHA)

Tindak balas ini adalah lebih sensitif daripada yang sebelumnya. Ia digunakan untuk diagnosis penyakit yang disebabkan oleh bakteria, parasit intrasel, protozoa. Ia begitu tertentu yang boleh mengesan walaupun kepekatan yang sangat rendah antibodi.

Untuk formulasi yang menggunakan sel-sel darah merah domba disucikan dan sel-sel darah merah manusia pretreated dengan antibodi atau antigen (bergantung kepada apa yang makmal mahu mencari). Dalam beberapa kes, sel-sel darah merah manusia dirawat dengan imunoglobulin. tindak balas serologi eritrosit dianggap sah jika hujan itu berlaku di bahagian bawah tiub. Reaksi positif yang kita boleh katakan apabila sel-sel disusun dalam bentuk payung terbalik, menduduki seluruh bahagian bawah. Tindak balas negatif diperolehi apabila sel-sel darah merah menyelesaikan dalam bentuk lajur atau butang di tengah-tengah bahagian bawah.

tindak balas pemendakan (RP)

tindak balas serologi jenis ini berkhidmat untuk mengenal pasti zarah antigen amat kecil. Ini boleh, sebagai contoh, protein (atau sebahagian daripadanya), sebatian protein dengan lipid atau karbohidrat, sebahagian daripada bakteria dan toksin mereka.

Sera bagi tindak balas diperolehi dengan serangan tiruan haiwan, biasanya arnab. Dalam kaedah ini, anda boleh mendapatkan benar-benar apa-apa serum precipitating. Staging serologi mekanisme yang sama hujan tindakan pada kromosom. Antibodi yang terkandung dalam serum mengikat kepada antigen dalam penyelesaian koloid untuk membentuk molekul protein yang besar, yang disimpan di bahagian bawah tiub atau pada substrat (gel). Kaedah ini dianggap sebagai sangat khusus dan dapat mengesan walaupun mengesan jumlah bahan.

Digunakan untuk mendiagnosis penyakit sampar, tularemia, antraks, meningitis dan penyakit lain. Juga terlibat dalam pemeriksaan forensik.

Gel ujian hujan

ujian serologi boleh dijalankan bukan sahaja dalam medium cecair, tetapi dalam gel agarose itu. Ini dipanggil kaedah pemendakan resap. Dengan itu, mengkaji komposisi campuran antigen kompleks. Kaedah ini adalah berdasarkan chemotaxis antigen untuk antibodi, dan sebaliknya. Gel mereka bergerak ke arah satu sama lain pada kelajuan yang berbeza dan mesyuarat untuk membentuk garisan hujan. Setiap baris - satu set K-AT.

Peneutralan exotosin antitoksin (RN)

serum bersifat penolak bisa boleh meneutralkan exotosin yang menghasilkan mikroorganisma. Berdasarkan data ini dan ujian serologi. Mikrobiologi menggunakan kaedah ini untuk pentitratan sera, toksin dan toxoids, serta aktiviti terapeutik mereka. Kekuatan peneutralan toksin ditentukan oleh unit konvensional - AE.

Selain itu, disebabkan tindak balas ini boleh menentukan spesies atau jenis yang dimiliki exotosin. Ia digunakan dalam diagnosis tetanus, difteria, botulism. kajian dapat dijalankan "pada kaca", dan dalam gel.

reaksi lysis (RL)

Serum imun, yang masuk ke dalam badan pesakit, mempunyai, selain daripada fungsi utamanya imuniti pasif, walaupun dan sifat lytic. Ia mampu melarutkan agen mikrob, unsur-unsur sel dan asing virus memasuki badan pesakit. Bergantung kepada kekhususan antibodi termasuk dalam serum diasingkan bactericidin, cytolysins, spirohetoliziny, hemolysins dan lain-lain.

Antibodi ini khusus dipanggil "pelengkap". Ia terdapat di hampir semua cecair badan, ia mempunyai struktur protein yang kompleks dan sangat sensitif kepada peningkatan suhu, yang digoncang, asid dan cahaya matahari langsung. Tetapi dalam keadaan yang kering dapat mengekalkan sifat-sifat lytic mereka sehingga enam bulan.

Terdapat beberapa jenis ujian serologi jenis ini:

- bacteriolysis;

- hemolisis.

Bacteriolysis dijalankan menggunakan serum darah pesakit dan serum imun tertentu dengan kuman streaming. Maka jika penyelidik melihat lysis bakteria, dan tindak balas yang akan dianggap sebagai bilangan yang mencukupi pelengkap positif hadir dalam darah.

Sambutan serologi darah kedua ialah bahawa penggantungan eritrosit dirawat serum yang mengandungi hemolysins pesakit, yang diaktifkan hanya di hadapan sebuah pujian tertentu. Jika ada, maka makmal menonton pembubaran sel-sel darah merah. Tindak balas ini digunakan secara meluas dalam perubatan moden untuk menentukan titer pelengkap (iaitu, jumlah terkecil memprovokasi lysis sel-sel darah merah) dalam serum darah dan untuk pengeluaran pelengkap mengikat assay. Ia adalah dengan cara ini dijalankan tindak balas serologi untuk sifilis - Wasserman.

penetapan pelengkap (RSK)

Tindak balas ini digunakan untuk mengesan antibodi serum kepada pesakit agen berjangkit dan juga untuk mengenalpasti pemula struktur antigen itu.

Sehingga ke tahap ini kita telah diterangkan satu ujian serologi mudah. RAC dianggap reaksi sukar, kerana ia berinteraksi bukan dua, tetapi tiga unsur: antibodi, antigen dan melengkapkan. Asasnya terletak pada hakikat bahawa interaksi antara antibodi dan antigen berlaku hanya di hadapan protein pujian yang terjerap pada permukaan yang terbentuk kompleks K-AT.

Diri mereka antigen selepas penambahan pelengkap, tertakluk kepada perubahan yang besar, yang menunjukkan kualiti tindak balas. Ini mungkin lysis, hemolisis, tidak boleh bergerak, bakteria atau kesan bacteriostatic.

Reaksi sendiri berlaku dalam dua fasa:

1. Pembentukan antibodi antigen, yang tidak cacat penyelidik ketara.
2. Menukar antigen di bawah tindakan pelengkap. Fasa ini biasanya dapat dikesan dengan mata kasar. Jika sambutan visual tidak kelihatan, kemudian gunakan sistem penunjuk tambahan yang membolehkan untuk mengesan perubahan.

sistem penunjuk

Tindak balas ini adalah berdasarkan mengikat pelengkap. Tiub ujian jam selepas menetapkan RSK ditambah eritrosit domba suci dan hemolitik serum tidak mengandungi pelengkap. Jika tiub itu ditinggalkan pelengkap tak terbatas, ia akan menyertai kompleks N-AT dibentuk antara sel-sel darah domba dan hemolysin, dan menyebabkan pembubaran mereka. Ini bermakna bahawa DGC adalah negatif. Jika sel-sel darah merah kekal utuh, maka, dengan itu, tindak balas adalah positif.

hemagglutination (RHA)

Terdapat dua hemagglutination berbeza. Salah seorang daripada mereka - serologi, ia digunakan untuk menentukan kumpulan darah. Dalam kes ini eritrosit berinteraksi dengan antibodi.

Dan tindak balas kedua tidak berkaitan dengan serologi, kerana sel-sel darah merah bertindak balas dengan hemagglutinin dihasilkan oleh virus. Oleh kerana setiap penguja bertindak hanya pada eritrosit tertentu (ayam, kambing biri-biri, monyet), kita boleh menganggap tindak balas ini sempit tertentu.

tindak balas positif atau negatif yang jelas, ia adalah mungkin untuk lokasi sel-sel darah di bahagian bawah tiub. Jika mereka memikirkan menyerupai payung terbalik, kemudian virus yang dikehendaki hadir di dalam darah pesakit. Dan jika semua sel-sel darah merah dibentuk seperti tiang duit syiling, tiada patogen tidak diketahui.

Reaksi hemagglutination perencatan (HAI)

Ini tindak balas yang sangat khusus, yang membolehkan untuk mewujudkan bentuk, jenis virus atau kehadiran antibodi khusus dalam serum darah pesakit.

Asasnya terletak pada hakikat bahawa antibodi ditambah kepada tiub yang mengandungi bahan ujian, menghalang pemendapan antigen pada eritrosit, dengan itu berhenti hemagglutination. Ini merupakan satu petunjuk kualitatif kehadiran antigen tertentu dalam darah kepada virus diingini tertentu.

Reaksi immunofluorescence (RIF)

tindak balas ini adalah berdasarkan kepada keupayaan untuk mengenal pasti kompleks dengan AT-AH pendarfluor mikroskop selepas pewarna rawatan flyuorohromnymi. Kaedah ini adalah mudah untuk digunakan, tidak memerlukan pengasingan budaya murni dan mengambil sedikit masa. Ia adalah penting untuk diagnosis pesat penyakit berjangkit.

Dalam amalan, ini ujian serologi dibahagikan kepada dua kategori: langsung dan tidak langsung.

RIF terus dihasilkan antigen yang sebelum diproses serum pendarfluor. Dan tidak langsung adalah bahawa ubat itu mulanya dirawat dengan diagnosticum konvensional terdiri daripada antibodi untuk antigen yang dikehendaki dan kemudian semula digunakan-whey pendarfluor, yang khusus untuk protein daripada kompleks K-AT, dan sel-sel mikrob kelihatan oleh mikroskop.