Kaedah mikrobiologi untuk kajian air, tanah dan udara

Mikro-organisma - kecil, kebanyakannya unisel makhluk, yang meluas di alam semula jadi. Mereka dijumpai dalam semua media (udara, tanah, air) pada manusia dan haiwan, dalam tumbuhan.

kepelbagaian kualitatif dan bilangan organisma bergantung terutamanya kepada sebatian pemakanan. Tetapi ia juga adalah penting kerana kelembapan, suhu, pengudaraan dan tindakan cahaya matahari dan faktor-faktor lain.

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. Kaedah untuk media semulajadi kebersihan dan kajian mikrobiologi boleh mengesan kehadiran patogen dan untuk menentukan jumlah mereka selaras dengan keputusan yang diperolehi, untuk membangunkan langkah-langkah untuk menghapuskan atau mencegah penyakit berjangkit. Di samping itu, akaun kuantitatif diperlukan untuk pemodelan ekosistem dan pembangunan proses semula jadi tadbir urus. . Mari kita kaji lanjut apakah kaedah-kaedah pemeriksaan mikrobiologi.

tanah

Ia dianggap oleh para ulama sebagai salah satu laluan mungkin penghantaran daripada penyakit berjangkit. Dengan rembesan manusia atau haiwan pesakit dalam tanah menembusi patogen. Sebahagian daripada mereka, khususnya, spora, boleh bertahan dalam tanah untuk jangka masa yang panjang (kadang-kadang selama beberapa dekad). позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). Tanah jatuh patogen seperti jangkitan berbahaya seperti tetanus, antraks, botulism, dan sebagainya. Kaedah kajian kebersihan-mikrobiologi tanah membolehkan anda mentakrif "kiraan mikrob" (bilangan mikroorganisma di dalam tanah gram a), dan indeks coli (bilangan E. coli) .

analisis tanah: gambaran keseluruhan

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. Kaedah untuk pemeriksaan mikrobiologi tanah perlu terutamanya disebabkan mikroskop dan budaya langsung kepada pepejal medium nutrien. Populasi mikroorganisma dan kumpulan mereka yang mendiami tanah, berbeza mengenai status taksonomi dan fungsi ekologi. Dalam bidang sains, mereka bersatu di bawah istilah generik "tanah biota." Primer - habitat besar mikroorganisma. Dalam gram tanah hadir dari 1 hingga 10 bilion sel-sel mereka. Dalam persekitaran ini, secara aktif mengambil penguraian bahan organik, dengan penyertaan pelbagai mikroorganisma saprophytic.

kajian mikroskopik kaedah mikrobiologi: langkah-langkah

Analisis sederhana bermula dengan persampelan. Bagi tujuan ini, sebelum ini dikupas dan parut pisau alkohol (spade boleh digunakan). Selepas itu, penyediaan sampel. Langkah seterusnya - mengira sel calitan berwarna. Mempertimbangkan setiap langkah secara berasingan.

persampelan

Dalam analisis tanah pertanian cenderung sampel yang diambil dari kedalaman keseluruhan lapisan. Pertama dikeluarkan 2-3 cm di atas tanah, kerana ia boleh hadir dalam mikroflora luaran. Selepas itu, dengan keluasan tanah dikaji mengambil monoliths. Panjang setiap daripada mereka mesti mematuhi ketebalan lapisan yang anda mahu untuk mencuba.

Pada plot 100-200 persegi. 7-10 m sampel yang dipilih. Berat setiap - perintah 0.5 kg. Sampel mesti bercampur dengan teliti dalam beg. Kemudian mengambil sampel purata seberat kira-kira 1 kg. Ia perlu diletakkan di dalam kertas kulit (steril) pakej yang terdapat di dalam beg kain. Sebelum mengarahkan analisis sampel yang disimpan dalam peti sejuk.

Penyediaan kajian

Tanah dikacau dicurahkan pada kaca kering. Pra-lap dengan alkohol dan membakar di atas pembakar. Dengan tanah spatula bercampur dengan teliti dan berkembang sama rata. Ia adalah wajib untuk mengeluarkan akar dan unsur-unsur asing yang lain. Untuk melakukan ini, menggunakan pinset. Sebelum pinset operasi dan spatula atas pembakar dinyalakan dan dibiarkan sejuk.

Pelbagai plot tanah diedarkan pada kaca, dipilih bahagian-bahagian kecil. Mereka membayar dalam hidangan porselin pada skala yang teknikal. является специальная обработка образца. Mandatori langkah kaedah mikroskopik kajian mikrobiologi adalah pemprosesan khas sampel. 2 hendaklah disediakan terlebih dahulu, flask steril. Saiz mereka tidak boleh melebihi 250 ml. Salah satu termos dituang ke dalam 100 ml air paip. Kerana ia mengambil 0,4-0,8 ml sampel cecair tanah dan dibasahkan dengan pes. Campuran perlu disapu dengan jari atau getah alu selama 5 minit.

Air dari flask pertama telah dipindahkan ke dalam jisim tanah flask kosong. Selanjutnya, menggosok belakang. Selepas massa ini dipindahkan kepada kelalang berhampiran api pembakar. Bekas dengan penggantungan tanah digegarkan pada shaker selama 5 min. Selepas itu, ia telah dibenarkan untuk menyelesaikan kira-kira 30 saat. Ini adalah perlu untuk membolehkan zarah besar untuk menyelesaikan. Selepas setengah jisim minit digunakan untuk menyediakan penyediaan.

bilangan sel pada calitan tetap

, разработанному Виноградским. kajian mikroskopik langsung tanah dijalankan dengan kaedah kajian mikrobiologi, yang dibangunkan Vinogradskii. Dalam jumlah tertentu penggantungan itu telah dikira bilangan sel mikroorganisma. Mengkaji calitan tetap boleh menyimpan ubat-ubatan dalam jangka masa panjang dan melakukan pengiraan pada bila-bila.

Penyediaan ubat seperti berikut. Jumlah tertentu buburan (biasanya 0,02-0,05 ml) digunakan dengan pipet mikro ke slaid. Kepada penyelesaian ini telah ditambah setitik agar-agar (polisakarida agaropectin campuran dan agarose diekstrak daripada alga coklat dan merah Laut Hitam), dikacau dengan cepat dan tersebar ke seluruh kawasan dalam 4-6 persegi. cm. Pap kering udara dan tetap untuk 20-30 minit. alkohol (96%). Seterusnya, dadah dibasahkan dengan air suling dan dimasukkan ke dalam p-p karbol erythrosine 20-30 min.

Selepas pewarnaan, ia dibasuh dan kering di udara. bilangan sel dilakukan dari kanta rendaman.

Menyemai di media pepejal

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. kaedah mikroskopik untuk pemeriksaan mikrobiologi dapat mengesan sebilangan besar mikroorganisma. Tetapi walaupun ini, kaedah inokulasi adalah yang paling biasa dalam amalan. asasnya terdiri dalam pembenihan jumlah ubat (penggantungan tanah) dalam piring Petri pada medium yang kukuh.

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. Kaedah penyelidikan mikrobiologi mengambil kira bukan sahaja kuantiti tetapi juga kumpulan, dan dalam beberapa kes, dan komposisi spesies flora mikroskopik. Mengira bilangan koloni dihasilkan, biasanya dari bahagian bawah piring Petri di cahaya yang dihantar. Pada kawasan yang dikira meletakkan penanda atau dakwat dot.

Analisis air

Mikroflora badan air, sebagai peraturan, mencerminkan komposisi mikrob tanah di sekelilingnya. имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. Dalam konteks ini, kaedah analisis kebersihan-mikrobiologi air dan tanah mempunyai kepentingan praktikal tertentu dalam kajian keadaan ekosistem tertentu. Air yang segar mengandungi, sebagai peraturan, cocci, bakteria berbentuk rod.

Anaerobes dalam air yang terdapat dalam kuantiti yang kecil. Sebagai peraturan, mereka membiak di bahagian bawah badan-badan air, di dalam lumpur, mengambil bahagian dalam proses pembersihan. lautan mikroflora dan laut advantageously diwakili halophytic (halophilic) bakteria.

Di dalam air, telaga bor boleh dikatakan tidak mikroorganisma. Ini adalah disebabkan oleh kapasiti penapisan lapisan tanah.

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. kaedah konvensional penyelidikan air mikrobiologi dianggap takrif indeks if-mikrob dan coli-titer atau. Penunjuk pertama menentukan bilangan bakteria dalam 1 ml cecair. indeks Coli mewakili bilangan koliform di dalam satu liter air, dan jika titer - bilangan minimum atau cecair pencairan maksimum di mana mereka masih boleh dikesan.

Penentuan bilangan mikrob

Kaedah kebersihan pemeriksaan mikrobiologi air adalah seperti berikut. Dalam 1 ml air ditentukan beberapa anaerobes mesophilic dan fakultatif (perantaraan) termasuk kiraan mampu pada daging-pepton agar (bahan utama) pada 37 darjah. pada siang hari untuk membentuk koloni dapat dilihat pada pembesaran 2-5 p. atau mata kasar.

является посев. Langkah utama kaedah analisis mikrobiologi air ditaburkan. Kerana setiap sampel disemai sekurang-kurangnya 2 kelantangan yang berbeza. Apabila analisis air paip di setiap cawan diperbuat daripada 1-0,1 ml cecair tulen dan tercemar ,01-,001 ml. Untuk inokulasi 0.1 ml atau jumlah yang lebih kecil cecair dicairkan dengan air suling (steril). Konsisten menyediakan pencairan perpuluhan. 1 ml setiap daripada mereka dibuat dalam dua hidangan petri.

Pembiakan dipenuhi agar nutrien. Ia mesti cair, dan sejuk untuk 45 darjah. Selepas kacau, sederhana aktif dibiarkan pada permukaan mendatar untuk pemejalan. Pada 37 darjah. tanaman ditanam sepanjang hari. позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. Kaedah dianggap penyelidikan air mikrobiologi mengambil kira keputusan mereka hidangan di mana bilangan koloni dalam lingkungan 30 hingga 300.

udara

Ia dianggap sebagai tanah transit bagi mikroorganisma. являются седиментация (оседание) и аспирация. Kaedah utama kajian mikrobiologi adalah pemendapan udara (menetap) dan aspirasi.

persekitaran udara mikroflora sewenang-wenangnya dibahagikan ke dalam pembolehubah dan berterusan. Kumpulan pertama termasuk yis, cocci chromogenic, spora-bearing bacillus coli dan mikroorganisma lain yang tahan pengeringan, pendedahan kepada cahaya. Wakil mikroflora berubah-ubah, menembusi ke udara dari habitat biasa, lama mengekalkan daya hidup mereka.

Di udara bandar-bandar besar mikroorganisma lebih daripada di persekitaran udara kawasan luar bandar. Lebih laut, hutan sangat sedikit bakteria. pembersihan udara memudahkan hujan: salji dan hujan. mikrob dalam rumah lebih daripada di kawasan lapang. bilangan mereka meningkat pada musim sejuk dalam ketiadaan pengudaraan biasa.

pemendapan

считается простейшим. Kaedah penyelidikan mikrobiologi dalam bidang mikrobiologi dianggap sebagai yang paling mudah. Ia adalah berdasarkan kepada menyelesaikan titisan dan zarah di permukaan agar dalam piring Petri terbuka di bawah graviti. kaedah pemendapan mungkin tidak tepat menentukan bilangan bakteria di udara. Hakikatnya adalah bahawa dalam cawan terbuka untuk menangkap pecahan halus daripada zarah habuk dan titisan bakteria agak sukar. Pada permukaan dikekalkan zarah terutamanya besar.

Kaedah ini tidak digunakan untuk analisis udara. Persekitaran ini dicirikan oleh turun naik yang besar dalam kelajuan aliran udara. Pemendapan boleh, bagaimanapun, digunakan jika tiada peranti yang lebih canggih atau sumber kuasa elektrik.

Menentukan bilangan mikrob dilakukan oleh kaedah Omelyansky. Mengikut saman itu, selama 5 minit pada kawasan permukaan 100 agar persegi. cm menyelesaikan beberapa bakteria hadir dalam 10 liter udara.

Memerintahkan 535 "Pada penyatuan kaedah mikrobiologi penyiasatan"

analisis bakteriologi menduduki tempat yang penting dalam aktiviti-aktiviti klinikal dan makmal kompleks bertujuan untuk diagnosis, pencegahan dan rawatan pelbagai penyakit berjangkit. Walau bagaimanapun, kajian alam sekitar, mereka tidak terhad.

Yang penting ialah analisis bakteriologi bahan biologi di hospital. Untuk penyelidikan yang dijalankan di kemudahan kesihatan, peningkatan keperluan. Tujuan Perintah "Pada penyatuan kaedah mikrobiologi penyiasatan" adalah untuk meningkatkan analisis bakteriologi, meningkatkan kualiti dan kecekapan diagnostik mikrobiologi.

pemeriksaan mikroskopik calitan pada wanita

Ia adalah satu kaedah utama kajian mengenai diagnosis jangkitan, jangkitan kelamin, dan jangkitan oportunis (jangkitan bakteria).

analisis mikroskopik untuk menilai komposisi kualitatif dan kuantitatif mikroflora, memeriksa ketepatan persampelan. Sebagai contoh, kehadiran epitelium faraj kapas kesat yang diambil daripada saluran serviks menunjukkan yang melanggar peraturan-peraturan pemilihan sampel biologi.

Dikatakan bahawa pemeriksaan mikrobiologi dalam kes ini biasanya diikuti dengan beberapa masalah. Ia berkaitan dengan hakikat bahawa dalam saluran kemaluan yang lebih rendah biasanya membentangkan mikroflora pelbagai yang berbeza pada umur yang berbeza. Untuk meningkatkan kecekapan penyelidikan dan telah membangunkan kaedah-kaedah yang seragam.

Diagnosis jangkitan virus

Ia dijalankan melalui kaedah mengesan RNA dan DNA patogen. Mereka adalah berdasarkan terutamanya kepada penentuan urutan nukleotida dalam bahan patologi. Untuk tujuan ini, probe molekul. Mereka buatan dihasilkan asid nukleik pelengkap kepada (pelengkap kepada) asid virus dilabel dengan label radioaktif atau biotin.

The keanehan kaedah yang diulang menyalin serpihan DNA tertentu yang mengandungi beberapa ratus (atau berpuluh-puluh) nukleotida pasangan. replikasi (menyalin) adalah sambungan yang boleh bermula hanya dalam unit tertentu. primers (primers) yang digunakan untuk membuatnya. Mereka oligonukleotida disintesis.

PCR diagnostik (polymerase chain reaction) adalah mudah dalam pelaksanaan. Kaedah ini membolehkan anda untuk segera mendapatkan hasilnya dengan menggunakan jumlah kecil bahan patologi. Menggunakan PCR diagnostik mengenal pasti akut, kronik dan terpendam (tersembunyi) jangkitan.

Apabila sensitiviti kaedah ini dianggap lebih lebih baik. Walau bagaimanapun, sistem ujian semasa tidak boleh dipercayai cukup, jadi diagnosis PCR yang tidak boleh menggantikan kaedah tradisional.