PembentukanSains

Diagnostics molekul: real-time PCR

Pada masa ini, mekanisme diagnostik molekul direka tindak balas rantai polymerase (PCR), yang merupakan peneraju bagi pembangunan sebilangan besar kaedah diagnosis penyakit, berdasarkan penentuan bahan genetik. Untuk menjalankan real-time PCR menggunakan gen serpihan (khususnya asid nukleik) daripada agen penyebab, yang tidak terdapat pada individu yang lain.

Prinsip PCR adalah pendaraban tertentu juta serpihan patogen DNA kali oleh polimerase DNA dalam satu unit khas, yang disebut sebagai sepeda haba, yang menyediakan pengulangan kitaran rejim suhu untuk program tertentu.

Diagnostics PCR membolehkan mengulangi siri amplifications, mengekalkan aktiviti enzim. Apabila pembesaran berlaku dengan lancar, dalam satu kitaran bilangan salinan sekeping tertentu DNA beregu patogen, selepas tiga puluh kitaran - seratus dan sepuluh. Itulah sebabnya PCR digunakan dalam diagnosis untuk menentukan patogen cukup kecil, pengenalan yang mana adalah mustahil tanpa ia.

Perlu diingatkan bahawa RNA tidak boleh menjadi template untuk PCR dalam masa nyata. Oleh itu, untuk mengesan RNA virus sebelum penguatan untuk DNA dikaitkan dengan serpihan yang berkaitan dengan ia. Tindak balas rantai polymerase membolehkan untuk menghasilkan DNA dan RNA pengukuran pathogen. Maklumat itu diperolehi digunakan untuk memantau keberkesanan terapi digunakan, dan penilaian prognosis klinikal.

Di samping itu, real-time PCR tidak memerlukan tindakan tambahan berkenaan dengan penyahsulitan DNA sasaran atau amplicons, yang menjadi penghalang untuk diagnosis yang betul dan membawa kepada keputusan yang palsu. Pendekatan ini membolehkan untuk tidak menggunakan elektroforesis langkah, yang membawa kepada produk risiko pengurangan tindak balas rantai polimerase. Juga, disebabkan oleh penurunan dalam bilangan manipulasi dengan ejen itu, mengurangkan masa kajian itu, ia memudahkan proses, mengurangkan kemungkinan kesilapan. PCR juga membolehkan anda menentukan awal salinan DNA patogen di dalam percubaan klinikal untuk membantu mengenal pasti tempoh exacerbations dan untuk mengambil langkah-langkah yang tepat pada masanya untuk mengubati pesakit.

Hari ini, terdapat sebilangan besar kaedah penguatan penetapan dalam masa nyata. Pelbagai teknik yang paling biasa digunakan yang memohon Amplicon dikaitkan dengan kuar fluorogenic, keamatan sinaran yang berbeza-beza bergantung kepada pengumpulan Amplicon dan dicatatkan dalam masa sebenar menggunakan alat khas dipanggil thermocycler dengan modul optik. Ia menyediakan tahap yang tinggi sensitiviti analisis. Pada produk PCR yang sama boleh dikesan, bersama-sama dengan kuantiti yang banyak oleh-produk, pada satu masa apabila menggunakan elektroforesis dalam beberapa kes tidak perasan.

Oleh PCR menggunakan sampel kawalan positif dan negatif dalam masa nyata. Oleh itu, sampel positif dan negatif dalam kajian yang dianalisis sebagai sampel berasingan, sampel kawalan mana diperkenalkan di setiap sampel itu dan pas semua langkah-langkah analisis.

Hari ini, terdapat sebilangan besar alat-alat untuk menjalankan tindak balas rantai polimerase. Ini termasuk Bio-Rad, Biosystems Gunaan, Cepheid dan Roche. Setiap daripada mereka mempunyai kelebihan dan kekurangan

Perlu diingatkan bahawa PCR - kaedah diagnosis yang digunakan dalam skala besar saintifik, penyelidikan dan pusat diagnostik di seluruh dunia, kerana ia memberi peluang untuk menjalankan tafsiran serta-merta keputusan.

Similar articles

 

 

 

 

Trending Now

 

 

 

 

Newest

Copyright © 2018 ms.unansea.com. Theme powered by WordPress.